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目的 CG6015基因作为RNA剪接体的调控因子,是否参与调控果蝇睾丸生殖干细胞(GSCs)尚不明确.文中旨在探讨CG6015基因在果蝇睾丸GSCs生命维持中的功能,并探索其中潜在的调控机制.方法 利用UAS-Gal4系统实现CG6015基因在果蝇睾丸GSCs中的特异性敲减.以W1118品系为对照组,Nos>CG6015 RNAi为实验组,采用免疫荧光染色技术分别观察2组睾丸的形态和GSCs的改变情况.在果蝇S2细胞中,应用基因沉默技术分别敲减阴性对照(NC)与CG6015基因,作为NC组与CG6015 siRNA组,利用qRT-PCR检测CG6015基因及RNA剪接体亚基Prp8、SmG和U2A的mRNA表达水平.结果 与对照组小睾丸的比例(0)比较,实验组(100%)明显升高(P<0.001).与对照组睾丸中的生殖融合体数量比较,实验组明显减少[(19.67±0.88)个vs(0.00±0.00)个,P<0.001].与对照组比较,实验组Eya阳性细胞数量明显增加[(9.67±0.67)个vs(25.67±5.21)个,P<0.05].与NC组Prp8、SmG基因的mRNA相对表达水平(1.00±0.00)比较,CG6015 siRNA组Prp8基因(0.39±0.03)明显下调,SmG基因(1.60±0.07)明显上调(P<0.05).结论 CG6015基因在果蝇睾丸中可以通过介导RNA剪接体来调控GSCs的生命维持,为男性不育症的致病机理提供了新思路.

作者:郑倩雯;陈霞;王敏;陈万银;栾晓瑾;颜一丹;方杰;胡兴;于骏

来源:医学研究生学报 2021 年 34卷 1期

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郑倩雯;陈霞;王敏;陈万银;栾晓瑾;颜一丹;方杰;胡兴;于骏
来源:
医学研究生学报 2021 年 34卷 1期
标签:
CG6015 果蝇睾丸 生殖干细胞 生命维持 基因沉默
目的 CG6015基因作为RNA剪接体的调控因子,是否参与调控果蝇睾丸生殖干细胞(GSCs)尚不明确.文中旨在探讨CG6015基因在果蝇睾丸GSCs生命维持中的功能,并探索其中潜在的调控机制.方法 利用UAS-Gal4系统实现CG6015基因在果蝇睾丸GSCs中的特异性敲减.以W1118品系为对照组,Nos>CG6015 RNAi为实验组,采用免疫荧光染色技术分别观察2组睾丸的形态和GSCs的改变情况.在果蝇S2细胞中,应用基因沉默技术分别敲减阴性对照(NC)与CG6015基因,作为NC组与CG6015 siRNA组,利用qRT-PCR检测CG6015基因及RNA剪接体亚基Prp8、SmG和U2A的mRNA表达水平.结果 与对照组小睾丸的比例(0)比较,实验组(100%)明显升高(P<0.001).与对照组睾丸中的生殖融合体数量比较,实验组明显减少[(19.67±0.88)个vs(0.00±0.00)个,P<0.001].与对照组比较,实验组Eya阳性细胞数量明显增加[(9.67±0.67)个vs(25.67±5.21)个,P<0.05].与NC组Prp8、SmG基因的mRNA相对表达水平(1.00±0.00)比较,CG6015 siRNA组Prp8基因(0.39±0.03)明显下调,SmG基因(1.60±0.07)明显上调(P<0.05).结论 CG6015基因在果蝇睾丸中可以通过介导RNA剪接体来调控GSCs的生命维持,为男性不育症的致病机理提供了新思路.