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目的 研究淫羊藿、女贞子配伍对自噬激活剂雷帕霉素(rapamycin,RAP)诱导的气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)自噬、凋亡及增殖活性的调节作用.方法 培养大鼠原代ASMCs,随机分为正常组、RAP组、淫羊藿组、女贞子组、配伍组.根据分组分别加入正常大鼠血清或含药大鼠血清;除正常组外,其余各组同时加入RAP诱导的ASMCs,48h后进行检测.电镜观察细胞超微结构;MTT法检测细胞活力;免疫细胞化学法检测增殖蛋白ki-67蛋白表达,评价细胞增殖活性;Annexin V-FITC/PI 法检测细胞凋亡活性;Western blot 法和细胞免疫荧光法检测 LC3、Beclin-1、mTOR、p-mTOR、Bax、Bcl-2、caspase-3及p53蛋白表达.结果 淫羊藿、女贞子配伍能显著抑制RAP诱导的ASMCs自噬,下调LC3-Ⅱ/Ⅰ比值(P<0.05)及Beclin-1蛋白表达(P<0.01);改善RAP诱导的细胞活力、增殖活性降低(P<0.01);抑制凋亡水平升高(P<0.01),且优于淫羊藿、女贞子单用组(P<0.05或P<0.01).此外,配伍组能上调caspase-3蛋白表达(P<0.05),下调p53蛋白表达(P<0.01);但对mTOR及p-mTOR、Bax及Bcl-2蛋白表达无显著影响.结论 淫羊藿、女贞子配伍能抑制RAP诱导的ASMCs的过度自噬/凋亡水平,恢复ASMCs的细胞活力及增殖活性,避免ASMCs过度损伤.

作者:王瀚;马紫童;龙玉婷;李玉曼;马再娜;于萍;刘仁慧

来源:医学研究杂志 2023 年 52卷 12期

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作者:
王瀚;马紫童;龙玉婷;李玉曼;马再娜;于萍;刘仁慧
来源:
医学研究杂志 2023 年 52卷 12期
标签:
气道平滑肌细胞 淫羊藿/女贞子 自噬 凋亡 增殖 ASMCs Herba epimedii/Fructus ligustri lucidi Autophagy Apoptosis Proliferation
目的 研究淫羊藿、女贞子配伍对自噬激活剂雷帕霉素(rapamycin,RAP)诱导的气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)自噬、凋亡及增殖活性的调节作用.方法 培养大鼠原代ASMCs,随机分为正常组、RAP组、淫羊藿组、女贞子组、配伍组.根据分组分别加入正常大鼠血清或含药大鼠血清;除正常组外,其余各组同时加入RAP诱导的ASMCs,48h后进行检测.电镜观察细胞超微结构;MTT法检测细胞活力;免疫细胞化学法检测增殖蛋白ki-67蛋白表达,评价细胞增殖活性;Annexin V-FITC/PI 法检测细胞凋亡活性;Western blot 法和细胞免疫荧光法检测 LC3、Beclin-1、mTOR、p-mTOR、Bax、Bcl-2、caspase-3及p53蛋白表达.结果 淫羊藿、女贞子配伍能显著抑制RAP诱导的ASMCs自噬,下调LC3-Ⅱ/Ⅰ比值(P<0.05)及Beclin-1蛋白表达(P<0.01);改善RAP诱导的细胞活力、增殖活性降低(P<0.01);抑制凋亡水平升高(P<0.01),且优于淫羊藿、女贞子单用组(P<0.05或P<0.01).此外,配伍组能上调caspase-3蛋白表达(P<0.05),下调p53蛋白表达(P<0.01);但对mTOR及p-mTOR、Bax及Bcl-2蛋白表达无显著影响.结论 淫羊藿、女贞子配伍能抑制RAP诱导的ASMCs的过度自噬/凋亡水平,恢复ASMCs的细胞活力及增殖活性,避免ASMCs过度损伤.