目的 探讨棕榈酸对人卵巢颗粒细胞KGN细胞株自噬和脂质代谢的影响及其机制.方法 以不同浓度棕榈酸单独或联合 3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理刺激KGN细胞,油红O染色实验检测细胞脂质沉积;细胞增殖试剂盒(CCK-8)法测定KGN 细胞的活性;DCFH-DA 荧光探针标记法检测细胞活性氧(ROS)含量;蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测固醇调节元件结合蛋白 1(SREBP1)表达水平、微管相关蛋白1 轻链3(LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ)、泛素结合蛋白p62、PTEN诱导的假定激酶 1(PINK1)、Parkin表达水平.结果 在 0~400 μmol·L-1 范围内,随着棕榈酸浓度上升,细胞内脂滴数量增多,SREBP1 表达量增加,细胞活性显著下降(P<0.05).与对照组比较,400 μmol·L-1棕榈酸处理组细胞内ROS含量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增高(P<0.05),p62、PINK1、Parkin蛋白相对表达量上调(P<0.05).使用自噬抑制剂3-MA预处理后,3-MA+棕榈酸处理组较 400 μmol·L-1棕榈酸处理组细胞活性升高(P<0.05),ROS含量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值降低(P<0.05),p62、PINK1、Parkin蛋白相对表达量降低(P<0.05).结论 棕榈酸对卵巢颗粒细胞具有脂毒性,可能通过PINK1/Parkin途经激活卵巢颗粒细胞自噬,并可被 3-MA逆转.
作者:宁薇;聂方钦;张哲
来源:医药导报 2023 年 42卷 9期