目的探讨冬凌草甲素对白血病NB4细胞的诱导凋亡作用及其机制.方法以不同质量浓度(8、16、24和32 μmol/L)的冬凌草甲素作用于体外培养的NB4细胞.应用四氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率;采用Hoechst 33258荧光染色法和琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡;采用蛋白印迹(Western blot)和比色法测定细胞凋亡前后caspase-3表达水平及其活性的变化.结果冬凌草甲素(16μmol/L以上浓度)对白血病NB4细胞具有显著的增殖抑制及诱导凋亡作用,并且呈现出一定的时间-效应和剂量-效应关系.Hoechst 33258荧光染色观察到典型的核浓缩、核碎裂等细胞凋亡的形态学变化,琼脂糖凝胶电泳观察到细胞凋亡时的DNA"梯形"条带;Western blot检测结果表明32 kDa的caspase-3酶原被激活,出现20 kDa的亚单位活化片段,同时在细胞凋亡过程中,caspase-3活性显著增高.结论冬凌草甲素能够通过激活caspase-3的表达而诱导NB4细胞发生凋亡,可为冬凌草甲素进一步应用于临床治疗急性白血病提供实验依据.
作者：刘加军；李桥；潘祥林；彭军；吴祥元；李铭权；林东军；林曲；黄仁魏
来源：中草药 2005 年 36卷 8期
