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目的 分析杜仲及其混伪品的ITS2条形码序列,探讨杜仲及其混伪品鉴定的新方法,为杜绝市售商品药材混乱现象提供技术支撑.方法 提取样品DNA,利用PCR方法对样品进行核基因ITS2片段扩增,采用DNA克隆测序技术对ITS2基因进行双向测序,所得序列经Seqman程序拼接后,用软件MEGA 4.1进行相关数据分析,并构建邻接(Nighbor-joining,NJ)树.利用网站已建立的ITS2数据库预测ITS2二级结构.结果 杜仲种内最大K2P遗传距离远远小于其与混伪品的种间最小K2P遗传距离；由构建的系统聚类树图可以看出,不同来源的杜仲样品聚成一支,表现为单性系,并与其他混伪品明显分开；比较ITS2二级结构发现,杜仲与其混伪品在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异.结论 ITS2序列作为DNA条形码可以有效地鉴别杜仲及其混伪品,为其种质资源鉴定及临床安全用药提供了重要分子依据.
作者：彭梓；朱金国；谭建锡；王利兵
来源：中草药 2013 年 44卷 21期
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