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目的 采用DNA条形码技术,比较了条形码序列ITSl和ITS2在贝母属植物中的鉴定效果.方法 从8个贝母属21个样品中提取了基因组DNA,进行ITS1、ITS2序列的PCR扩增和测序,并比较了各样品DNA提取率、PCR扩增率及测序成功率.测序数据采用BLAST搜索法评价2种序列的鉴定能力,采用SPSS软件进行遗传距离分析,采用MEGA软件进行系统发育树的构建.结果 对比不同物种ITS1、ITS2序列的一级结构差异,发现其ITS1序列长度为205~229 bp,有信息位点27个(所占比例11.8%),鉴定成功率为72.2%;ITS2序列长度为236~244 bp,有信息位点20个(所占比例8.2%),鉴定成功率为100%.ITS1序列的种内及种间遗传距离分别为0.001 8和0.066 1,而ITS2序列的种内及种间遗传距离分别为0.000 5和0.046 8,且种内高度保守;系统发育树构建结果显示,2种ITS序列能准确区分出浙贝母类群、川贝母类群和北方贝母类群,而ITS2序列所构建的系统发育树准确度更高.结论 ITS2序列能够更准确鉴定不同物种贝母,适合作为贝母属植物的通用条形码序列.

作者:俞超;梁孝祺;陈金金;盛梦俊;冯亚斌;王忠华

来源:中草药 2014 年 45卷 11期

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作者:
俞超;梁孝祺;陈金金;盛梦俊;冯亚斌;王忠华
来源:
中草药 2014 年 45卷 11期
标签:
贝母属 ITS1 ITS2 DNA条形码 分子鉴定 Fritillaria L. ITS1 ITS2 DNA barcoding molecular identification
目的 采用DNA条形码技术,比较了条形码序列ITSl和ITS2在贝母属植物中的鉴定效果.方法 从8个贝母属21个样品中提取了基因组DNA,进行ITS1、ITS2序列的PCR扩增和测序,并比较了各样品DNA提取率、PCR扩增率及测序成功率.测序数据采用BLAST搜索法评价2种序列的鉴定能力,采用SPSS软件进行遗传距离分析,采用MEGA软件进行系统发育树的构建.结果 对比不同物种ITS1、ITS2序列的一级结构差异,发现其ITS1序列长度为205~229 bp,有信息位点27个(所占比例11.8%),鉴定成功率为72.2%;ITS2序列长度为236~244 bp,有信息位点20个(所占比例8.2%),鉴定成功率为100%.ITS1序列的种内及种间遗传距离分别为0.001 8和0.066 1,而ITS2序列的种内及种间遗传距离分别为0.000 5和0.046 8,且种内高度保守;系统发育树构建结果显示,2种ITS序列能准确区分出浙贝母类群、川贝母类群和北方贝母类群,而ITS2序列所构建的系统发育树准确度更高.结论 ITS2序列能够更准确鉴定不同物种贝母,适合作为贝母属植物的通用条形码序列.