目的 研究白桦Betula platyphylla3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase,BpHMGR)全长基因结构特征及编码蛋白性质,揭示其节律表达模式以及对外源NO信号分子的响应机制.方法 通过RACE技术克隆白桦BpHMGR基因,应用生物信息学软件对BpHMGR及其编码蛋白进行详细分析,利用实时荧光定量PCR定量分析BpHMGR基因在昼夜节律变化中的表达模式.根据BpHMGR氨基酸序列构建系统进化树,分析昼夜节律以及外源NO对白桦叶片中BpHMGR转录水平的影响.结果 BpHMGR基因全长1 764 bp,包含完整开放阅读框,已上传至NCBI,并获得登录号KJ452334,其编码蛋白由587aa组成.白桦BpHMGR基因与大豆(XP 003519474.1)、葡萄(XP_002275827.1)、苜蓿(XP 003617066.1)亲缘关系较近.结论 BpHMGR随昼夜周期变化呈现出节律表达特性,在夜晚21:00时达到峰值.初步揭示了外源NO能诱导白桦细胞内二萜代谢途径的关键酶BpHMGR基因上调表达,进而促进三萜产物齐墩果酸的合成.
作者:李思达;梁楠松;周姗;詹亚光;曾凡锁
来源:中草药 2016 年 47卷 6期