目的 共转orca3/g1 0h双基因于长春花毛状根,提高抗癌生物碱量.方法 通过构建pCAMBIA 1304++ orca3 +g10h表达载体,利用发根农杆菌介导获得双转orca3/g1 0h基因长春花毛状根.利用RT-qPCR研究共转orca3/g1oh基因长春花毛状根萜类吲哚生物碱(TIAs)生物合成途径中相关基因的转录差异.采用HPLC研究共转orca3/g1 0h基因长春花毛状根TIAs(包括长春碱、长春新碱和阿吗碱)量.结果 转基因长春花毛状根中与TIAs生物合成相关基因asα、ggpps、g10h、str、tdc、cpr、sgd和dat转录水平均较非转基因长春花普通根高.HPLC结果表明,转基因长春花毛状根总TIAs量达到58.23 mg/g,是非转基因长春花普通根的27.5倍.长春碱和长春新碱的平均质量分数均较非转基因普通根高.其中,长春碱平均质量分数最高,为51.30 mg/g,是非转基因普通根的197.3倍.结论 共转orca3/g1 0h基因能够有效提高长春花毛状根中TIAs量.
作者：陈艺璇；朱帅旗；龚一富；刘林；王小飞；王何瑜
来源：中草药 2016 年 47卷 18期
