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目的 分析研究黄花蒿3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)启动子的活性表达及其核心序列.方法 以β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因作为报告基因,通过构建包括HMGR启动子全长序列在内的5个不同长度表达载体,并采用农杆菌介导法转化烟草以及对转化烟草进行GUS染色.结果 转HMGR启动子烟草的根、茎、叶、花、果荚均发现蓝色;脱水和高温胁迫会降低该启动子的表达,低温胁迫对其影响不明显;启动子片段AaGPX1、AaGPX2和AaGPX3具有驱动GUS报告基因表达的功能,而AaGPX4和AaGPX5则未有此功能.结论 HMGR启动子在烟草整个生长期内均能够稳定表达;该启动子对低温不敏感,而对高温和脱水条件敏感;该启动子的核心序列在P-HMGR-3区域,而AaGPX2与AaGPX3片段的非重叠区则存在与HMGR启动子活性强弱相关的调控元件.

作者:龙金花;向奕;肖文军;刘硕谦

来源:中草药 2016 年 47卷 19期

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龙金花;向奕;肖文军;刘硕谦
来源:
中草药 2016 年 47卷 19期
标签:
黄花蒿 青蒿素 HMGR启动子 活性表达 核心序列 Artemisia annua L. artemisinin HMGR promoter active expression character core sequnce
目的 分析研究黄花蒿3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)启动子的活性表达及其核心序列.方法 以β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因作为报告基因,通过构建包括HMGR启动子全长序列在内的5个不同长度表达载体,并采用农杆菌介导法转化烟草以及对转化烟草进行GUS染色.结果 转HMGR启动子烟草的根、茎、叶、花、果荚均发现蓝色;脱水和高温胁迫会降低该启动子的表达,低温胁迫对其影响不明显;启动子片段AaGPX1、AaGPX2和AaGPX3具有驱动GUS报告基因表达的功能,而AaGPX4和AaGPX5则未有此功能.结论 HMGR启动子在烟草整个生长期内均能够稳定表达;该启动子对低温不敏感,而对高温和脱水条件敏感;该启动子的核心序列在P-HMGR-3区域,而AaGPX2与AaGPX3片段的非重叠区则存在与HMGR启动子活性强弱相关的调控元件.