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目的 研究牛樟芝总三萜(ACTT)提取工艺及其抗肿瘤活性.方法 采用星点设计-效应面法(CCD-RSM)优化ACTT的提取工艺;通过MTT法检测其对人肝癌HepG2细胞体外增殖抑制作用;以最佳质量浓度的ACTT提取物(ACTTE)处理HepG2细胞,应用荧光显微镜进行形态学观察;应用AnnexinV凋亡检测试剂盒进行流式细胞分析,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 优化的工艺为加20倍量的90%乙醇,超声提取2次,每次40 min,超声功率400 W,ACTT提取率达11.87%,实际值与预测值的偏差为1.56%;不同质量浓度(12.5~200 μg/mL)的ACTTE对HepG2细胞的增殖均有明显的抑制作用(P<0.01);直接形态显微观察及Hoechst33342荧光染色可观察到核浓缩及核碎裂等典型细胞凋亡特征及凋亡小体;流式细胞仪结果显示,给药组细胞凋亡率与空白组相比,有显著差异(P<0.01).结论 CCD-RSM优化牛樟芝的超声醇提工艺,实际值与预测值吻合度高,预测性良好,是可行的;ACTTE体外对HepG2细胞有明显的增殖抑制及诱导凋亡的作用.

作者:吕莎;张梦雅;罗晓云;王春丽;黄松;贺莲

来源:中草药 2016 年 47卷 22期

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作者:
吕莎;张梦雅;罗晓云;王春丽;黄松;贺莲
来源:
中草药 2016 年 47卷 22期
标签:
牛樟芝 总三萜 星点设计 效应面法 HepG2细胞 MTT法 Hoechst33342荧光染色 Antrodia camphorata total triterpenoids central composite design response surface methodology HepG2 cell MTT assay Hoechst33342 fluorescence staining
目的 研究牛樟芝总三萜(ACTT)提取工艺及其抗肿瘤活性.方法 采用星点设计-效应面法(CCD-RSM)优化ACTT的提取工艺;通过MTT法检测其对人肝癌HepG2细胞体外增殖抑制作用;以最佳质量浓度的ACTT提取物(ACTTE)处理HepG2细胞,应用荧光显微镜进行形态学观察;应用AnnexinV凋亡检测试剂盒进行流式细胞分析,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 优化的工艺为加20倍量的90%乙醇,超声提取2次,每次40 min,超声功率400 W,ACTT提取率达11.87%,实际值与预测值的偏差为1.56%;不同质量浓度(12.5~200 μg/mL)的ACTTE对HepG2细胞的增殖均有明显的抑制作用(P<0.01);直接形态显微观察及Hoechst33342荧光染色可观察到核浓缩及核碎裂等典型细胞凋亡特征及凋亡小体;流式细胞仪结果显示,给药组细胞凋亡率与空白组相比,有显著差异(P<0.01).结论 CCD-RSM优化牛樟芝的超声醇提工艺,实际值与预测值吻合度高,预测性良好,是可行的;ACTTE体外对HepG2细胞有明显的增殖抑制及诱导凋亡的作用.