目的 探讨黄芪多糖通过Wnt/β-catenin信号通路对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响.方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测HepG2细胞增殖能力和存活率:Annexin V-FITC/PI双染和Caspase-3活性检测细胞凋亡;荧光素酶实验检测黄芪多糖(100、200 mg/L)处理后HepG2细胞Wnt/β-catenin通路活性改变;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting法检测细胞内的β-catenin、c-myc和Cyclin D1表达水平.结果 与对照组比较,随着黄芪多糖质量浓度的增加和作用时间的延长,HepG2细胞存活率显著降低(P<0.05).与对照组比较,黄芪多糖100、200 mg/L组HepG2细胞凋亡率显著升高(P<0.05):凋亡关键因子Caspase-3的相对活性显著升高(P<0.05),cleaved Caspase-3蛋白水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著降低;荧光素酶活性显著降低(P<0.05);β-catenin、c-myc和Cyclin D1 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01).结论 黄芪多糖通过下调Wnt/β-catenin信号通路抑制凋亡相关基因Bcl-2的表达,促进HepG2细胞凋亡.
作者:吕君;朱鹏飞;刘艳民;曾庆磊;余祖江
来源:中草药 2018 年 49卷 21期