目的 制备交联纳米SiO2固定化蜗牛酶,并对其理化性质、酶解淫羊藿苷为宝藿苷Ⅰ的最适酶解条件及酶学性能进行考察.方法 采用共价偶联法将蜗牛酶固定在戊二醛交联纳米SiO2上,以相对酶活力为指标,对固定化条件进行优化;采用透射电镜(TEM)、傅里叶红外光谱(FTIR)和元素分析法对固定化蜗牛酶的理化性质进行表征;并以淫羊藿苷为底物,以游离酶为对照,考察固定化蜗牛酶的最适酶解条件及酶解动力学参数、重复利用性、热稳定性等酶学性能.结果 固定化蜗牛酶制备的最佳酶载比为1:3,固定化时间为6h;其转化淫羊藿苷的最适酶解条件为pH 5.0,转化温度60℃,酶与底物质量比1:2,转化时间12 h.固定化蜗牛酶的酶解动力学参数最大反应速率(Vmax)为0.43 μg/min,米氏常数(Km)为0.78 mmol/L,重复使用5次后的相对酶活仍能保持在70％以上.结论 制备的交联纳米SiO2固定化蜗牛酶机械强度高、稳定性好,不但可重复使用,还可定向水解淫羊藿苷为活性更强的宝藿苷Ⅰ,工艺简单易行,转化效率高,适宜于工业化生产.
作者：李瑞云；刘聪燕；许婷；杨茹；陈彦
来源：中草药 2019 年 50卷 20期
