目的 建立龙葵Solanum nigrum 愈伤组织最优培养体系,研究愈伤组织在不同培养时间下各生理指标变化和澳洲茄碱、澳洲茄边碱的积累,为工业化制备澳洲茄碱和澳洲茄边碱奠定基础.方法 研究不同外植体及培养基对龙葵愈伤组织诱导的影响,采用响应面试验设计方法优化愈伤组织诱导的激素配比,运用考马斯亮蓝G-250法测定可溶性蛋白含量,TTC还原法测定细胞活力,邻苯二酚法测定多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活性,氮蓝四唑光化还原法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,愈创木酚比色法测定过氧化物酶(peroxidase,POD)活性,硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,高效液相色谱法测定澳洲茄碱及澳洲茄边碱含量.结果 愈伤组织诱导最佳外植体为龙葵茎段,最适培养基为MS+1.43 mg/LNAA+2.15 mg/L 6-BA+2.48 mg/L KT,愈伤组织增殖最适培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA.愈伤组织鲜质量增长量呈"S"型趋势,20 d时细胞活力达到最高峰值,可溶性蛋白含量与POD活性均呈先升高后降低的趋势,SOD活性在20 d与30 d出现2个峰值,MDA含量呈先降低后升高的变化趋势,在培养后期PPO活性下降,可能与愈伤组织褐化有关,澳洲茄碱与澳洲茄边碱含量变化趋势一致,在第30天时达到峰值.结论 龙葵愈伤组织生长
作者：陈媛媛；刘秀岩；刘福顺；杨世海
来源：中草药 2022 年 53卷 16期
