背景与目的:在肺癌的基础研究中,有特定基因变化的肺癌细胞株非常重要.k-ras激活和p53突变在肺癌的发生发展中有重要作用.本研究通过诱导小鼠肺癌生成,对肿瘤进行培养,建立p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺癌细胞株.方法:用病毒吸入法,对p53loxp/loxp,Loxp-Stop-Loxp k-rasG12D转基因小鼠肺部细胞进行条件性基因敲除,诱导小鼠产生肺癌.通过HE染色和PCR法对小鼠肺癌组织进行组织病理学和基因型鉴定,对肿瘤细胞原代培养建立p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺癌细胞株,并通过软琼脂克隆形成实验、生长曲线分析和核型分析对细胞株进行验证.结果:成功建立p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺腺癌细胞株.p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺癌细胞株体外生长速度与人肺腺癌细胞A549生长速度接近,能够在软琼脂中形成肉眼可见的克隆.结论:成功建立p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺癌细胞株,为下一步的实验研究打下了基础.
作者：孙艺华；李立；潘俊；叶小磊；王作云；冯艳；陈海泉
来源：中国癌症杂志 2009 年 19卷 5期
