目的 研究程序性细胞死亡蛋白4(programmed cell death protein 4,PDCD4)在脓毒症诱导的急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)中的作用机制,以及调控PDCD4 表达通过丝裂原活化蛋白激酶 3(mitogen-activated protein kinase 3,MAP2K3)和 p38 蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)对脓毒症 AKI 起到潜在治疗作用.方法 用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激人肾小管上皮细胞(HK-2)构建脓毒症AKI细胞模型.进一步用腺病毒介导siRNA和过表达载体抑制和上调AKI细胞模型中PDCD4 的表达;CCK-8 法检测细胞增殖;用DCFH-DA及激光共聚焦显微镜检测细胞中 ROS水平,用总 SOD活性检测试剂和MDA检测试剂盒检测细胞中SOD和MDA水平;免疫共沉淀验证PDCD4 和MAP2K3 之间的蛋白相互作用;TUNEL染色法检测细胞凋亡;RT-qPCR和Western blot检测 PDCD4 及相关基因的mRNA和蛋白表达水平;ELISA法检测患者血清中炎症相关因子水平.结果 LPS诱导可以促进HK-2 细胞中PDCD4 表达,下调PDCD4 可抑制LPS诱导的HK-2 细胞的炎症、氧化应激及细胞凋亡.数据库预测及免疫共沉淀证实PDCD4 可以与MAP2K3 相互作用,且在LPS诱导的HK-2细胞中,MAP2K3 表达水平显著增强.MAP2K3 过表达和p38 MAPK激动剂可以减轻PDCD4 下调对LPS诱导的

作者：蒋伟；张益楠；张健锋；黄中伟

来源：中国急救医学 2024 年 44卷 4期