目的:建立稳定的人脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分离培养体系,观察其移植对脑瘫(CP)大鼠功能恢复的影响及细胞的存活、迁移、向神经细胞分化的情况,并与神经节苷脂(GM1)注射对CP鼠神经功能恢复进行对比.方法:采集足月新生儿脐带血100ml,分离出单个核细胞,体外培养并予5-溴脱氧嘧啶尿苷(Brdu)标记72h;受孕17d孕鼠腹腔注射脂多糖(LPS)0.4mg/(kg·d),12h后置于缺氧环境2~2.5h,4h后再次腹腔注射同剂量LPS,孕鼠自体分娩,生后4周,通过行为学评分选择CP模型动物80只,随机分为4组:CP组(CP模型)、假移植组(CP模型+PBS)、MSCs移植组(CP模型+MSCs)、GM1注射组(CP模型+GM1),每组20只.移植后第1、2、3周应用免疫荧光法观察Brdu标记的MSCs的存活、迁移,移植后第4周,通过行为学评价观察大鼠神经功能恢复情况,应用免疫荧光法检测其胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达情况.结果:MSCs移植比GM1注射使大鼠握持时间更长,足错误次数更少(P<0.05);移植的MSCs可在大鼠脑组织中存活,并向四周脑组织迁移,(0.45±0.68)个MSCs表达GFAP,(0.15±0.36)个MSCs表达NSE.结论:人脐血MSCs移植比神经节苷脂注射较好的提高CP大鼠神经功能的恢复,移植细胞可在大鼠脑缺血区域中存活、迁移,并部分向星
作者:王丽敏;郭佳丽;杨自金;谭振香;田玉凤;王超;卢思广
来源:中国康复 2015 年 30卷 5期