目的:研究宫颈癌细胞系C33a和Siha中核糖核苷酸还原酶小亚基M2(RRM2)表达与细胞对吉西他滨(Gem)敏感性的相关性。方法:以0.1~3.2μmol/L Gem处理C33a细胞,以0.5~512μmol/L Gem处理Siha细胞,72 h后用MTT法测定细胞活力,计算半数抑制浓度(IC50);使用Western blot法和逆转录-聚合酶链反应检测各细胞中RRM2表达;采用浓度梯度倍增和大剂量冲击相结合的方法对Siha细胞进行Gem耐药诱导培养,构建Siha/Gem耐药细胞株;在Siha/Gem细胞中,使用RNA干扰技术敲低RRM2表达并检测敲低前后Gem对细胞的IC50。结果:Gem对C33a、Siha细胞的IC50分别为0.63、16.8μmol/L。与C33a细胞比较, Siha细胞中RRM2的表达较高。与Siha细胞相比,Siha/Gem耐药细胞(耐药指数为16.26)中RRM2表达增强。Gem对敲低RRM2表达的Siha/Gem耐药细胞的IC50降低,其逆转耐药倍数为4.24。结论:宫颈癌细胞系中RRM2表达可能与细胞对Gem的敏感性呈负相关,敲低RRM2表达可增加细胞对Gem的敏感性。
作者:李梦熊;邓柳枝;梁琼
来源:中国药房 2015 年 34期