目的 探讨蛇床子素促进宫颈癌HeLa细胞发生自噬的潜在作用机制.方法 不同浓度蛇床子素(0、10、20、40、80、160、240、320 mg·L-1)作用于HeLa细胞,MTT法检测蛇床子素对HeLa细胞增殖的抑制作用;透射电镜观察经蛇床子素干预的HeLa细胞形态;单丹磺酰尸胺(monodansylcada-verine,MDC)染色检测自噬水平;流式细胞术检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Western blot分析线粒体相关蛋白MFN1、DPR1表达水平;JC-1荧光探针检测线粒体膜电位变化;建立裸鼠宫颈癌体内移植瘤模型探讨蛇床子素对宫颈癌的抑制作用;Western blot检测PINK1、Parkin和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平.结果 蛇床子素能明显抑制HeLa细胞增殖;通过透射电镜观察,经蛇床子素干预的HeLa细胞有典型的自噬小体形成;MDC染色荧光强度增强,细胞发生自噬;线粒体融合蛋白MFN1表达下调,分裂蛋白DRP1表达上调;JC-1显示线粒体膜电位下降;流式细胞术检测结果显示细胞内ROS水平升高,且能被自噬抑制剂3-MA逆转;裸鼠瘤质量被蛇床子素明显抑制;Western blot结果显示,线粒体自噬关键因子PINK1、Parkin蛋白表达增加,LC3Ⅱ/Ⅰ的比值也增加.结论 蛇床子素能诱导HeLa细胞发生自噬,其机制可能与促进HeLa细胞ROS产生和PINK1/Parkin通路有关.
作者：刘国翔；戴平；皇甫梦杰；王娟；陈旭
来源：中国药理学通报 2023 年 39卷 2期
