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目的: 构建TNF-α rs1800620( SNP1)和TNF-α rs4645843( SNP2)稳转株的细胞模型,研究SNPs对LX-2 细胞系内TNF-α含量的影响.方法:利用野生型TNF-α定点突变合成TNF-α SNP1/TNF-α SNP2突变型质粒,慢病毒包装后转染至LX-2细胞株构建稳转株,分别采用RT-qPCR和Western blot检测各重组细胞中TNF-α mRNA和蛋白水平.结果: 基因测序表明突变型质粒构建成功,倒置显微镜拍照表明细胞有绿色荧光表达稳转株构建成功,RT-qPCR和Western blot检测结果表明与野生组比较,SNP1、SNP2均能显著降低TNF-α mRNA和蛋白水平(P<0.05).结论: 稳定表达TNF-α/TNF-α SNP1/TNF-α SNP2 LX-2细胞模型构建成功,且SNP1、SNP2均能显著降低TNF-α mRNA和蛋白水平.
作者：吕舰；张洪；王丽；高洁芳
来源：中国药师 2018 年 21卷 10期
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