目的 探讨巴戟天提取物水晶兰苷对破骨细胞生成的抑制作用.方法 将RAW264.7细胞系接种于含有10%胎牛血清的杜贝克改良伊格尔培养基(DMEM)中,分为A组、B组、C组、D组,均加入核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF),B组、C组、D组分别加入水晶兰苷药液(浓度分别为10,20,50μmol/L),连续培养3 d.采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法测定不同浓度水晶兰苷药液对破骨细胞生成的毒性影响,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法测定不同浓度水晶兰苷药液对破骨细胞生成的影响,采用实时荧光定量(RT-qPCR)法、蛋白质印迹(WB)法测定破骨细胞关键转录因子活化T细胞核因子1(NFATc1)的mRNA和蛋白表达水平.结果 MTT结果显示,各组光密度值(OD值)均在1.25~1.28之间,组间无明显差异(P>0.05);B组、C组、D组TRAP染色细胞数分别为(87.88±8.52)个、(50.38±11.78)个、(25.88±7.81)个,均明显低于A组的(132.10±11.28)个(P<0.05),且在限定浓度范围内与剂量呈正相关;B组、C组、D组NFATc1的mRNA表达水平随水晶兰苷浓度的升高而降低,与A组比较,C组和D组有显著差异(P<0.05);WB试验结果与mRNA表达水平相符.结论 水晶兰苷在体外试验中可能是通过降低NFATc1的表达水平来抑制破骨细胞的
作者:王宥涵;贺宝荣
来源:中国药业 2020 年 29卷 9期