目的 探讨低氧条件下低氧诱导因子1α(HIF-1α)调控蛋白酶激活受体1(PAR1)在低氧诱导心肌细胞凋亡中的作用及机制.方法 将大鼠心肌细胞系H9c2细胞培养在95％O2及5％CO2环境中作为常氧组,培养在1％O2、94％N2、5％CO2环境中作为低氧组,并作不同时间梯度;采用四氮唑比色(MTT)法和原位末端转移酶标记(TUNEL)试剂盒法分别检测常氧组和低氧组中H9c2细胞活性和细胞凋亡情况;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹(WB)法分别从mRNA和蛋白水平上检测HIF-1α和PAR1的表达.通过细胞转染siNC与PAR1 siRNA质粒24 h处理H9c2细胞,采用MTT法和TUN试剂盒检测细胞活性和细胞凋亡情况;通过qRT-PCR和WB法检测常氧组(A组),常氧+NC siRNA组(B组),低氧+NC siRNA组(C组)和低氧+PAR1 siRNA组(D组)H9c2细胞中Bcl-2与Bax的表达;在细胞转染HIF-1αsiRNA后再低氧处理H9c2细胞,采用RNA印迹(NB)法和WB法检测PAR1蛋白表达水平.结果 与A组比较,在低氧环境下,H9c2细胞活性降低并发生凋亡,HIF-1α和PAR1稳定高表达;与直接低氧处理组比较,在H9c2细胞中敲除PAR1后再低氧处理细胞,可明显缓解因低氧诱导的心肌细胞凋亡,提高H9c2细胞活力,在H9c2细胞中敲除PAR1后会使Bcl-2表达上调、Bax表达下调;细胞转染HIF-1αsiRNA后再低氧处理
作者：孟庆雯；王晓茜；朱厚玲；张园园
来源：中国药业 2020 年 29卷 15期
