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目的 探讨西洋参中人参皂苷Rh2(简称Rh2)在脂多糖(LPS)致人卵巢颗粒细胞瘤细胞系KGN细胞炎性反应中的作用及作用机制.方法 通过网络药理学方法筛选西洋参治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的潜在活性成分及靶点.以200 ng/mL LPS作用KGN细胞6 h诱导炎性反应,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定KGN细胞中炎性因子白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,采用2′,7′-二氯双氢荧光素双乙酸酯(DCFH-DA)染色法测定活性氧(ROS)的水平;40μmol/L Rh2作用KGN细胞24 h后,采用免疫印迹(Western blot)法测定哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在LPS诱导的KGN细胞中的表达水平.结果 网络药理学分析结果显示,共筛选出西洋参的主要化学成分11个、潜在靶点144个、治疗PCOS的靶点13个,其中Rh2与下游靶基因mTOR是西洋参抗PCOS的关键活性成分及潜在作用靶点.分子生物学研究结果显示,Rh2能抑制LPS导致的KGN细胞中ROS和mTOR表达水平的升高,下调IL-1β和TNF-α的表达;低表达(50 nmol/L)mTOR能促进Rh2缓解LPS导致的KGN细胞炎性反应,过表达(3μg)mTOR能逆转此现象.结论 Rh2通过调控mTOR的表达水平参与LPS导致的卵巢颗粒细胞炎性反应.

作者:王文芳;海鑫

来源:中国药业 2023 年 32卷 1期

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作者:
王文芳;海鑫
来源:
中国药业 2023 年 32卷 1期
标签:
多囊卵巢综合征 卵巢颗粒细胞 人参皂苷Rh2 西洋参 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 炎性反应 网络药理学 分子生物学
目的 探讨西洋参中人参皂苷Rh2(简称Rh2)在脂多糖(LPS)致人卵巢颗粒细胞瘤细胞系KGN细胞炎性反应中的作用及作用机制.方法 通过网络药理学方法筛选西洋参治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的潜在活性成分及靶点.以200 ng/mL LPS作用KGN细胞6 h诱导炎性反应,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定KGN细胞中炎性因子白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,采用2′,7′-二氯双氢荧光素双乙酸酯(DCFH-DA)染色法测定活性氧(ROS)的水平;40μmol/L Rh2作用KGN细胞24 h后,采用免疫印迹(Western blot)法测定哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在LPS诱导的KGN细胞中的表达水平.结果 网络药理学分析结果显示,共筛选出西洋参的主要化学成分11个、潜在靶点144个、治疗PCOS的靶点13个,其中Rh2与下游靶基因mTOR是西洋参抗PCOS的关键活性成分及潜在作用靶点.分子生物学研究结果显示,Rh2能抑制LPS导致的KGN细胞中ROS和mTOR表达水平的升高,下调IL-1β和TNF-α的表达;低表达(50 nmol/L)mTOR能促进Rh2缓解LPS导致的KGN细胞炎性反应,过表达(3μg)mTOR能逆转此现象.结论 Rh2通过调控mTOR的表达水平参与LPS导致的卵巢颗粒细胞炎性反应.