目的 探讨乌苏酸对人胰腺癌细胞PANC-1 增殖、凋亡的影响.方法 以 1.25,2.5,5,10,25,50 μmol/L乌苏酸培养PANC-1细胞24,48,72 h,采用四氮唑盐(MTT)法测定细胞活性.实验分为对照1组(等体积二甲基亚砜)及乌苏酸低、中、高剂量组(5,10,20 μmol/L乌苏酸),显微镜下观察细胞形态,采用Western blot法检测磷脂酰肌醇 3 激酶(PI3K),磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt),磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR),活化半胱氨酸蛋白酶 3(Cleaved Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2 关联 X蛋白(Bax)的蛋白表达水平,采用细胞集落形成实验观察细胞增殖情况.实验分为对照 2 组(等体积二甲基亚砜)和乌苏酸组(10 μmol/L乌苏酸),采用细胞划痕实验观察细胞培养 48,72 h的迁移情况.利用分子对接实验模拟乌苏酸与PI3K和Akt2 的相互作用.结果 随着乌苏酸浓度的升高,PANC-1 细胞活性逐渐减弱,24,48,72 h时的半数抑制浓度(IC50)分别为 7.89,6.26,5.06 μmol/L.与对照 1 组比较,乌苏酸各剂量组细胞逐渐失去原有形态,且随着浓度的增加,变形细胞数目随之增加,且细胞边界模糊不清;细胞数量显著减少(P<0.05);乌苏酸各剂量组细胞Cleaved Caspase-3、Bax蛋白的表达水平均显著升高,乌苏酸中、高剂量组细胞Bcl-2蛋白表达水平显著降低,乌苏酸各剂
作者:金俊华;赵承伟;付佳;郑桂茹
来源:中国药业 2024 年 33卷 2期