目的:探讨siRNA沉默过度内质网应激(ERS)下C-Jun氨基末端激酶(JNK)通路在缺血/再灌注肺凋亡中的作用.方法:采用C57BL/6J小鼠左侧肺原位缺血/再灌注(I/R)损伤模型.实验随机分为7组(n=10),包括假手术组(Sham组),缺血/再灌注组(I/R组),PBS+ Lipofectamine2000TM转染试剂组(I/R+ PBS+ Lipo组),阴性对照组(I/R+ SCR组),JNK-siRNA组(I/R+ siRNAJNK1组、I/R+ siRNAJNK2组、I/R+ siRNAJNK3组).各组实验结束后处死小鼠,留取左肺,分别检测肺湿干重比(W/D)和总肺水含量(TLW);光镜观察肺组织形态结构变化,并进行肺组织损伤评估(IQA);RT-PCR、检测JNK和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的基因表达;Western blot检测磷酸化JNK(p-JNK)和GRP78的蛋白表达;原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测肺细胞凋亡指数(AI).结果:与Sham组相比,I/R+ PBS+ Lipo组和SCR组各组W/D、TLW、IQA、JNK与GRP78 mRNA和p-JNK、GRP78蛋白质表达量及AI均明显升高(P＜0.01),光镜显示肺组织结构出现明显损伤性变化,且各组两两比较,上述各指标均无统计学差异;与I/R+ PBS+ Lipo组和SCR组相比,JNK-siRNA各组GRP78表达水平无明显变化,余各指标均降低(P＜0.05,P＜0.01)且肺组织损伤减轻.结论:I/R引起肺组织细胞发生过度的ERS,并通过JNK通路引起细胞凋亡,损伤肺组织.

作者：郝卯林；赵珊；陈海娥；陈丹；宋冬；何金波；汪洋；王万铁

来源：中国应用生理学杂志 2014 年 30卷 1期