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目的利用人热休克蛋白基因启动子结合加热选择性诱导目的基因在肿瘤局部表达,建立肿瘤基因治疗新方法.方法分离不同大小的人热休克蛋白70基因5'端调控顺序作为启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)作报告基因,构建热诱导型GFP表达质粒.转染体外培养的肿瘤细胞,或将稳定转导GFP表达质粒的肿瘤细胞移植到大鼠皮窗内,或将热诱导型GFP腺病毒注射到肿瘤内,加热后直接利用荧光显微镜观察GFP表达水平.结果 400 bp人热休克蛋白70基因5'端调控顺序背景表达水平低,加热后可被显著激活,能作为启动子有效驱动下游目的基因的表达.GFP作报告基因使体内外肿瘤细胞内目的基因的表达水平仅通过荧光显微镜便能直接观察到.结论利用热诱导型启动子结合加热能选择性诱导目的基因在肿瘤局部表达,为肿瘤基因治疗提供了一种新方法.

作者:黄倩;李川源

来源:中华病理学杂志 2001 年 30卷 3期

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作者:
黄倩;李川源
来源:
中华病理学杂志 2001 年 30卷 3期
标签:
肿瘤 高温,诱发 基因表达 基因疗法 热休克蛋白质类70
目的利用人热休克蛋白基因启动子结合加热选择性诱导目的基因在肿瘤局部表达,建立肿瘤基因治疗新方法.方法分离不同大小的人热休克蛋白70基因5'端调控顺序作为启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)作报告基因,构建热诱导型GFP表达质粒.转染体外培养的肿瘤细胞,或将稳定转导GFP表达质粒的肿瘤细胞移植到大鼠皮窗内,或将热诱导型GFP腺病毒注射到肿瘤内,加热后直接利用荧光显微镜观察GFP表达水平.结果 400 bp人热休克蛋白70基因5'端调控顺序背景表达水平低,加热后可被显著激活,能作为启动子有效驱动下游目的基因的表达.GFP作报告基因使体内外肿瘤细胞内目的基因的表达水平仅通过荧光显微镜便能直接观察到.结论利用热诱导型启动子结合加热能选择性诱导目的基因在肿瘤局部表达,为肿瘤基因治疗提供了一种新方法.