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目的明确人肿瘤转移抑制基因TMSG-1蛋白分子量大小和细胞定位,制备和鉴定TMSG-1单克隆抗体,并探讨其在临床肿瘤标本检测的价值.方法采用多肽固相合成法(Fmoc法)合成15肽TMSG-1抗原片段,并与匙孔槭血蓝蛋白(mcKLH)偶联,免疫BAL B/C小鼠,采用细胞融合、ELISA法检测和快速有限稀释法筛选和制备单克隆抗体,并应用Western印迹和免疫组织化学ABC法染色进行抗体鉴定和肿瘤检测.结果筛选出抗TMSG-1抗体的单克隆杂交瘤细胞系C8,免疫球蛋白亚类测定为IgM.半抗原竞争抑制实验证实该抗体是特异的抗TMSG-1抗体.Western印迹显示不转移癌细胞亚系2B4和LH7有明显的相对分子质量为45 000蛋白条带,而高转移亚系1E8和BE1则条带很弱.细胞免疫组织化学染色显示2B4和LH7强阳性,为细胞膜和细胞质着色;而1E8和BE1则为阴性.石蜡切片ABC法检测52例乳腺癌和41例结肠癌组织中TMSG-1蛋白表达发现:未转移的癌组织多为中度阳性或强阳性,中度以上阳性率分别为36

作者:裴斐;由江峰;宁钧宇;杨京平;王玉萍;韩志惠;王洁良;崔湘霖;杨邵敏;郑杰

来源:中华病理学杂志 2005 年 34卷 1期

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作者:
裴斐;由江峰;宁钧宇;杨京平;王玉萍;韩志惠;王洁良;崔湘霖;杨邵敏;郑杰
来源:
中华病理学杂志 2005 年 34卷 1期
标签:
乳腺肿瘤 结肠肿瘤 肿瘤转移 抗体,单克隆 癌,组织多肽抗原
目的明确人肿瘤转移抑制基因TMSG-1蛋白分子量大小和细胞定位,制备和鉴定TMSG-1单克隆抗体,并探讨其在临床肿瘤标本检测的价值.方法采用多肽固相合成法(Fmoc法)合成15肽TMSG-1抗原片段,并与匙孔槭血蓝蛋白(mcKLH)偶联,免疫BAL B/C小鼠,采用细胞融合、ELISA法检测和快速有限稀释法筛选和制备单克隆抗体,并应用Western印迹和免疫组织化学ABC法染色进行抗体鉴定和肿瘤检测.结果筛选出抗TMSG-1抗体的单克隆杂交瘤细胞系C8,免疫球蛋白亚类测定为IgM.半抗原竞争抑制实验证实该抗体是特异的抗TMSG-1抗体.Western印迹显示不转移癌细胞亚系2B4和LH7有明显的相对分子质量为45 000蛋白条带,而高转移亚系1E8和BE1则条带很弱.细胞免疫组织化学染色显示2B4和LH7强阳性,为细胞膜和细胞质着色;而1E8和BE1则为阴性.石蜡切片ABC法检测52例乳腺癌和41例结肠癌组织中TMSG-1蛋白表达发现:未转移的癌组织多为中度阳性或强阳性,中度以上阳性率分别为36