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目的 探讨TAp63γ诱导的人食管鳞癌细胞株EC9706细胞凋亡的分子机制.方法 用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测食管鳞癌EC9706细胞中凋亡诱导因子(AIF)和p63的表达;将质粒pcDNA3.1-TAp63γ转入EC9706细胞,流式细胞仪检测凋亡率,并用激光共聚焦显微镜和亚细胞器分离技术观察分析AIF的转位;采用RNA干扰技术下调AIF的蛋白表达水平,caspase广谱抑制剂zVAD.fmk预处理细胞,再用流式细胞仪分析EC9706细胞表达TAp63γ后凋亡率的变化.结果 EC9706细胞中AIF表达且定位在细胞质中,p63基因的表达亚型是△Np63,TAp63γ不表达;在pcDNA3.1-TAp63γ转染组和pcDNA3.1-p53转染组的细胞质及细胞核蛋白中分别检测到AIF,pcDNA3.1转染组的胞核蛋白无AIF信号;pcDNA3.1转染组、pcDNA3.1-TAp63γ转染组、AIF-siRNA干扰后再转染pcDNA3.1-TAp63γ组、zVAD.fmk处理后再转染pcDNA3.1-TAp63γ组和AIF-siRNA干扰联合zVAD.fmk处理后再转染pcDNA3.1-TAp63γ组的凋亡率分别为1.37

作者:范天黎;郝义彬;许培荣;侯桂琴;姜国忠;杨观瑞

来源:中华病理学杂志 2007 年 36卷 6期

知识库介绍

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作者:
范天黎;郝义彬;许培荣;侯桂琴;姜国忠;杨观瑞
来源:
中华病理学杂志 2007 年 36卷 6期
标签:
食管肿瘤 癌,鳞状细胞 细胞凋亡 RNA干扰 细胞系,肿瘤
目的 探讨TAp63γ诱导的人食管鳞癌细胞株EC9706细胞凋亡的分子机制.方法 用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测食管鳞癌EC9706细胞中凋亡诱导因子(AIF)和p63的表达;将质粒pcDNA3.1-TAp63γ转入EC9706细胞,流式细胞仪检测凋亡率,并用激光共聚焦显微镜和亚细胞器分离技术观察分析AIF的转位;采用RNA干扰技术下调AIF的蛋白表达水平,caspase广谱抑制剂zVAD.fmk预处理细胞,再用流式细胞仪分析EC9706细胞表达TAp63γ后凋亡率的变化.结果 EC9706细胞中AIF表达且定位在细胞质中,p63基因的表达亚型是△Np63,TAp63γ不表达;在pcDNA3.1-TAp63γ转染组和pcDNA3.1-p53转染组的细胞质及细胞核蛋白中分别检测到AIF,pcDNA3.1转染组的胞核蛋白无AIF信号;pcDNA3.1转染组、pcDNA3.1-TAp63γ转染组、AIF-siRNA干扰后再转染pcDNA3.1-TAp63γ组、zVAD.fmk处理后再转染pcDNA3.1-TAp63γ组和AIF-siRNA干扰联合zVAD.fmk处理后再转染pcDNA3.1-TAp63γ组的凋亡率分别为1.37