目的 观察重组组织因子途径抑制物(rTFPI)对大鼠肾脏系膜细胞(MsC)凋亡的影响,并探讨其可能相关的凋亡机制.方法 免疫组织化学(ABC)法检测人肾穿组织中TFPI表达;免疫荧光法检测培养正常大鼠MsC中TFPI表达;将rTFPI及其不同结构域蛋白分别作用于大鼠MsC,Hoechst 33258染色观察MsC细胞核形态变化;流式细胞仪定量检测MsC细胞凋亡率;DNA片段凝胶电泳分析MsC凋亡情况;Western blot检测凋亡相关激酶半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)、bel-2以及Fas蛋白的表达.结果 系膜增生型肾小球肾炎肾小球内TFPI表达高于轻微病变者;正常大鼠MsC中有TFPI表达;rTFPI及其C末端能诱导大鼠MsC发生凋亡,并具有剂量和时间依赖性劝口入rTFPI后,MsC的凋亡率分别为对照组的2.1、3.0及4.9倍(P<0.05).活性形式的caspase-3和Fas蛋白表达明显高于对照组,bcl-2表达无明显变化.结论 rTFPI能诱导正常大鼠MsC发生凋亡,并且其主要功能区位于C末端,死亡受体Fas/FasL信号通路可能参与了rTFPI诱导MsC凋亡的过程.
作者:林伊凤;马端;梁旺;蒋涛;赵仲华;张农
来源:中华病理学杂志 2008 年 37卷 11期