目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60细胞分化过程中WT1基因及其异构体表达水平及比例变化.方法 采用ATRA诱导HL-60细胞分化,以硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验及细胞免疫标记CD11b检测判断细胞分化程度;即时荧光定量RT-PCR方法检测HL-60细胞在诱导分化过程中总WT1、WT1(17AA+)及WT1(KTS+)的表达,并计算出WT1(+/+)、WT1(+/-)、WT1(-/+)、WT1(-/-)四种异构体的比例.结果 ATRA诱导HL-60细胞分化过程中NBT阳性率及CD11b表达阳性率与诱导分化前(0 h)相比均显著增加(P<0.05,P<0.001).随着细胞分化,WT1表达水平由0 h的(4.17±2.21)× 10~(-3)降低至96 h的(7.53±2.30)×10~(-4);17AA+和KTS+两类异构体的比例也逐渐下降,17AA+异构体比例由0 h的0.60±0.05降到96 h的0.42±0.08(P<0.05).KTS+异构体比例由0.53±0.08降至96 h的0.41±0.04(P<0.05);四种异构体的比例变化表现不一致,WT1(+/+)比例由0 h的0.32±0.06降至96 h的0.17±0.03,而WT1(-/-)比例由0 h的0.19±0.04升至96 h的0.34±0.05,另外两类异构体比例变化差异无统计学意义.结论 ATRA诱导HL-60细胞分化过程中总WT1表达水平逐渐降低,分化前异构体以WT1(+/+)为主,而分化后以WT1(-/-)为主,提示WT1基因可能通过调节四种异构体比例而发挥抑制或促进分化的作用.
作者:徐菁;王宏伟;杨涛;覃艳红;李晓红
来源:中华病理学杂志 2010 年 39卷 3期