目的 研究配对免疫球蛋白样受体B(paired immunoglobulin-like receptor B,PirB)对体外视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)生长的影响. 方法 分离野生型C57B J/6小鼠的RGCs,免疫荧光检测RGCs中PirB的表达情况,荧光定量PCR和Western blot方法检测培养1,3,5,7,9d时PirB在RGCs中的表达水平,并将培养的原代RGCs分为对照组(对RGCs不加处理)、慢病毒转染干扰PirB组(A组)、慢病毒转染干扰NgR组(B组)、慢病毒转染干扰PirB且联用睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)组(C组)、慢病毒转染干扰NgR且联用CNTF组(D组)和仅CNTF处理组(E组).使用MTT法及从形态学方面观察RGCs的生长发育情况. 结果 免疫荧光确定PirB在RGCs中表达,其mRNA和蛋白水平随时间呈现先升高后下降的变化,分别于培养5d和7d时达最高水平.A组和B组PirB或NgR的表达降低,A组RGCs的生长状态较对照组旺盛:3d时为(40.2±5.3)μm:(29.1±3.8)μm,5d时为(72.2±4.2)μm:(52.3±8.2)μm(P <0.05);B组、D组和E组与对照组比较、C组与A组比较,RGCs的生长状态差异均无统计学意义(P均>0.05). 结论 阻断PirB可明显改善RGCs的生长状态,为临床治疗视神经损伤提供了新的思路.
作者:宋平;袁容娣;陈春林;韩非;孙敏;叶剑
来源:中华创伤杂志 2014 年 30卷 6期