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目的 研究多药耐药基因--MDR1及MDR3基因沉默逆转卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞A2780/taxol对紫杉醇耐药的作用.方法 用真核质粒介导的针对MDR1及MDR3基因的短发夹状RNA(shRNA)转染A2780/taxol细胞(分别为MDR1组、MDR3组),空质粒转染作为对照(空载体组).流式细胞仪分别检测细胞早期凋亡、罗丹明123(Rh123)积聚情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL)检测细胞晚期凋亡情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞对紫杉醇的半数抑制浓度(IC50),RT-PCR技术检测MDR1及MDR3 mRNA的表达,蛋白印迹法(western blot)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达.结果 转染后,MDR1组及MDR3组A2780/taxol细胞的早期凋亡率分别达(20.21±0.56)

作者:肖兰;高瑞;卢实;卢美松;梁铭霖;任利容;王泽华

来源:中华妇产科杂志 2007 年 42卷 6期

知识库介绍

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作者:
肖兰;高瑞;卢实;卢美松;梁铭霖;任利容;王泽华
来源:
中华妇产科杂志 2007 年 42卷 6期
标签:
卵巢肿瘤 紫杉酚 基因,MDR RNA,小分子干扰 抗药性,肿瘤
目的 研究多药耐药基因--MDR1及MDR3基因沉默逆转卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞A2780/taxol对紫杉醇耐药的作用.方法 用真核质粒介导的针对MDR1及MDR3基因的短发夹状RNA(shRNA)转染A2780/taxol细胞(分别为MDR1组、MDR3组),空质粒转染作为对照(空载体组).流式细胞仪分别检测细胞早期凋亡、罗丹明123(Rh123)积聚情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL)检测细胞晚期凋亡情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞对紫杉醇的半数抑制浓度(IC50),RT-PCR技术检测MDR1及MDR3 mRNA的表达,蛋白印迹法(western blot)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达.结果 转染后,MDR1组及MDR3组A2780/taxol细胞的早期凋亡率分别达(20.21±0.56)