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目的 探讨2-脱氧葡萄糖(2DG)诱导葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达上调对宫内窘迫胎鼠的脑神经元凋亡及内质网一线粒体联合作用的影响.方法 (1)建立胎鼠宫内窘迫模型后随机分为正常组(10只)、缺血缺氧再灌注组(40只,再灌注3 h、6 h、12 h、24 h)及治疗组(40只,宫内窘迫模型制备成功后即刻腹腔注射2DG 100 mg/kg体重,再灌注3 h、6 h、12 h、24 h).(2)采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记(TUNEL)法检测胎鼠脑神经元凋亡情况及2DG对其的影响;蛋白印迹(western blot)法检测GRP78、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)9、12及细胞色素C蛋白的表达水平,观察其与胎鼠脑神经元凋亡的关系及2DG对其的影响.结果 (1)正常组胎鼠阳性细胞数为(4.3±1.8)个/mm2;GRP78、caspase-9、-12、细胞色素C蛋白表达水平分别为0.012±0.003、0.004±0.003、0.006±0.002、0.012±0.005.(2)缺血再灌注组胎鼠再灌注3 h、6 h、12 h、24 h的阳性细胞数分别为(43.6±11.4)、(64.4±9.3)、(74.2±12.1)及(97.3±8.9)个/mm2,与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05);GRP78蛋白表达水平分别为0.092±0.008、0.078±0.006、0.054±0.009、0.038±0.007,细胞色素C蛋白表达水平分别为0.040±0.006、0.076±0.009、0.108±0.005、0.089

作者:张华;卢敏;漆洪波;张建华

来源:中华妇产科杂志 2008 年 43卷 5期

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作者:
张华;卢敏;漆洪波;张建华
来源:
中华妇产科杂志 2008 年 43卷 5期
标签:
胎儿窘迫 脱氧葡萄糖 热休克蛋白质类 分子监控蛋白类 神经元 细胞凋亡 疾病模型,动物 Fetal distress Deoxyglucose Heat-shock proteins Molecular chaperones Neurons Apoptosis Disease models,animal
目的 探讨2-脱氧葡萄糖(2DG)诱导葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达上调对宫内窘迫胎鼠的脑神经元凋亡及内质网一线粒体联合作用的影响.方法 (1)建立胎鼠宫内窘迫模型后随机分为正常组(10只)、缺血缺氧再灌注组(40只,再灌注3 h、6 h、12 h、24 h)及治疗组(40只,宫内窘迫模型制备成功后即刻腹腔注射2DG 100 mg/kg体重,再灌注3 h、6 h、12 h、24 h).(2)采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记(TUNEL)法检测胎鼠脑神经元凋亡情况及2DG对其的影响;蛋白印迹(western blot)法检测GRP78、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)9、12及细胞色素C蛋白的表达水平,观察其与胎鼠脑神经元凋亡的关系及2DG对其的影响.结果 (1)正常组胎鼠阳性细胞数为(4.3±1.8)个/mm2;GRP78、caspase-9、-12、细胞色素C蛋白表达水平分别为0.012±0.003、0.004±0.003、0.006±0.002、0.012±0.005.(2)缺血再灌注组胎鼠再灌注3 h、6 h、12 h、24 h的阳性细胞数分别为(43.6±11.4)、(64.4±9.3)、(74.2±12.1)及(97.3±8.9)个/mm2,与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05);GRP78蛋白表达水平分别为0.092±0.008、0.078±0.006、0.054±0.009、0.038±0.007,细胞色素C蛋白表达水平分别为0.040±0.006、0.076±0.009、0.108±0.005、0.089