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目的 探讨B、T淋巴细胞弱化因子(BTLA)胞外段联合热休克蛋白(HSP)70-宫颈癌TC-1细胞(HSP70-TC-1)抗原肽复合物治疗小鼠宫颈癌模型的效果.方法 (1)将TC-1细胞接种于C57BL/6小鼠成瘤后,实时荧光定量PCR技术检测小鼠肿瘤组织中BTLA、疱疹病毒侵入介质(HVEM)mRNA的表达,流式细胞仪检测肿瘤组织中浸润的淋巴细胞细胞膜表面BTLA、HVEM的表达(以荧光强度表示).(2)小鼠接种TC-1细胞后,根据处理方法的不同分为5组,即pcDNA3.1(注射空载体pcDNA3.1质粒,作为对照)、psBTLA(注射表达BTLA胞外段的真核表达载体psBTLA质粒)、HSP70(注射HSP70-TC-1抗原肽复合物)、HSP70+pcDNA3.1(注射HSP70-TC-1抗原肽复合物和pcDNA3.1质粒)、HSP70+psBTLA(注射HSP70-TC-1抗原肽复合物和psBTLA质粒)组,观察各组小鼠体内肿瘤的生长情况;并采用实时荧光定量PCR技术检测各组肿瘤组织中相关免疫基因包括γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)2、IL-10、转化生长因子β(TGF-β)和人叉头型基因P3(FoxP3)mRNA的表达;免疫组化法计数各组瘤旁组织中CD8+T淋巴细胞;7-氨基放线菌素D/羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯双标法检测各组脾淋巴细胞的杀伤效应(以杀伤率表示);氚标记胸腺嘧啶核苷掺入法测定各组脾淋巴细胞的增殖活性,酶联免疫吸附试验测定各组脾淋

作者:韩凌斐;邱伟民;胡程;王玲;姚红霞;熊诗诣;孟梦;方勇;马丁

来源:中华妇产科杂志 2010 年 45卷 8期

知识库介绍

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韩凌斐;邱伟民;胡程;王玲;姚红霞;熊诗诣;孟梦;方勇;马丁
来源:
中华妇产科杂志 2010 年 45卷 8期
标签:
宫颈肿瘤 受体,免疫 HSP70热休克蛋白质类 疱疹病毒科 疾病模型,动物 Uterine cervical neoplasms Receptors,immunologic HSP70 heat-shock proteins Herpesviridae Disease models,animal
目的 探讨B、T淋巴细胞弱化因子(BTLA)胞外段联合热休克蛋白(HSP)70-宫颈癌TC-1细胞(HSP70-TC-1)抗原肽复合物治疗小鼠宫颈癌模型的效果.方法 (1)将TC-1细胞接种于C57BL/6小鼠成瘤后,实时荧光定量PCR技术检测小鼠肿瘤组织中BTLA、疱疹病毒侵入介质(HVEM)mRNA的表达,流式细胞仪检测肿瘤组织中浸润的淋巴细胞细胞膜表面BTLA、HVEM的表达(以荧光强度表示).(2)小鼠接种TC-1细胞后,根据处理方法的不同分为5组,即pcDNA3.1(注射空载体pcDNA3.1质粒,作为对照)、psBTLA(注射表达BTLA胞外段的真核表达载体psBTLA质粒)、HSP70(注射HSP70-TC-1抗原肽复合物)、HSP70+pcDNA3.1(注射HSP70-TC-1抗原肽复合物和pcDNA3.1质粒)、HSP70+psBTLA(注射HSP70-TC-1抗原肽复合物和psBTLA质粒)组,观察各组小鼠体内肿瘤的生长情况;并采用实时荧光定量PCR技术检测各组肿瘤组织中相关免疫基因包括γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)2、IL-10、转化生长因子β(TGF-β)和人叉头型基因P3(FoxP3)mRNA的表达;免疫组化法计数各组瘤旁组织中CD8+T淋巴细胞;7-氨基放线菌素D/羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯双标法检测各组脾淋巴细胞的杀伤效应(以杀伤率表示);氚标记胸腺嘧啶核苷掺入法测定各组脾淋巴细胞的增殖活性,酶联免疫吸附试验测定各组脾淋