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目的 探讨L型Ca2+通道亚型( Cav1.3)抑制剂——硝苯地平(nifedipine)和T型Ca2+通道亚型( Cav3.1)抑制剂——米贝拉地尔(mibefradil)对雌激素作用下子宫内膜癌细胞系HEC-1A细胞生物学特性的影响.方法 (1)以10μmol/L的nifedipine和mibefradil分别预处理HEC-1 A细胞15 min,然后予10 μmol/L的17β雌二醇(17β-E2)和100 μmol/L的雌二醇偶联牛血清白蛋白(E2-BSA)分别处理HEC-1A细胞0min、5min、15 min、30 min、1h、2h,采用逆转录(RT) -PCR技术检测各时间点HEC-1A细胞中Cav1.3和Cav3.1 mRNA的表达,蛋白印迹法检测HEC-1A细胞中Cav1.3和Cav3.1蛋白的表达.(2)以不同浓度(均分别为1.25、2.5、5、10、20、40、80、100 μmol/L)的nifedipine 和mibefradil分别处理HEC-1A细胞24、48、96h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖情况.(3)以10 μmol/L的nifedipine和mibefradil分别处理HEC-1A细胞0min、30 min、1h、6h、24h后,采用膜联蛋白V(annexin V)-碘化丙啶(PI)双染色法检测细胞的凋亡率.(4)以10 μmol/L的nifedipine和mibefradil处理HEC-1A细胞36 h,体外侵袭实验检测细胞的体外迁移能力(以穿膜细胞数表示).结果(1) nifedipine预处理后:①加入17β-E2:HEC-1A细胞中Cav1.3 mRNA的表达在15 min时降至最低,

作者:包晓霞;王建六;魏丽惠

来源:中华妇产科杂志 2012 年 47卷 3期

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作者:
包晓霞;王建六;魏丽惠
来源:
中华妇产科杂志 2012 年 47卷 3期
标签:
子宫内膜肿瘤 硝苯地平 咪拉地尔 钙通道阻滞药 雌激素类 肿瘤细胞 培养的 Endometrial neoplasms Nifedipine Mibefradil Calcium channel blockers Estrogens Tumor cells,cultured
目的 探讨L型Ca2+通道亚型( Cav1.3)抑制剂——硝苯地平(nifedipine)和T型Ca2+通道亚型( Cav3.1)抑制剂——米贝拉地尔(mibefradil)对雌激素作用下子宫内膜癌细胞系HEC-1A细胞生物学特性的影响.方法 (1)以10μmol/L的nifedipine和mibefradil分别预处理HEC-1 A细胞15 min,然后予10 μmol/L的17β雌二醇(17β-E2)和100 μmol/L的雌二醇偶联牛血清白蛋白(E2-BSA)分别处理HEC-1A细胞0min、5min、15 min、30 min、1h、2h,采用逆转录(RT) -PCR技术检测各时间点HEC-1A细胞中Cav1.3和Cav3.1 mRNA的表达,蛋白印迹法检测HEC-1A细胞中Cav1.3和Cav3.1蛋白的表达.(2)以不同浓度(均分别为1.25、2.5、5、10、20、40、80、100 μmol/L)的nifedipine 和mibefradil分别处理HEC-1A细胞24、48、96h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖情况.(3)以10 μmol/L的nifedipine和mibefradil分别处理HEC-1A细胞0min、30 min、1h、6h、24h后,采用膜联蛋白V(annexin V)-碘化丙啶(PI)双染色法检测细胞的凋亡率.(4)以10 μmol/L的nifedipine和mibefradil处理HEC-1A细胞36 h,体外侵袭实验检测细胞的体外迁移能力(以穿膜细胞数表示).结果(1) nifedipine预处理后:①加入17β-E2:HEC-1A细胞中Cav1.3 mRNA的表达在15 min时降至最低,