目的 探讨槲皮素对宫颈癌细胞中乙酰肝素酶(HPA)表达的影响.方法 免疫荧光法检测宫颈癌细胞系HeLa、Caski细胞中HPA蛋白的表达.实验分为3组,槲皮素组:在HeLa、Caski细胞中加入含不同浓度(20、40、80 μmol/L)槲皮素的RPMI 1640培养基;阳性对照组:小分子RNA(siRNA)转染HeLa、Caski细胞沉默其HPA的表达后,加入RPMI 1640培养基;空白对照组:在HeLa、Caski细胞中仅加入RPMI 1640培养基.3组HeLa、Caski细胞分别培养24、48、72 h后,采用实时定量PCR技术和蛋白印迹法检测其HPA mRNA和蛋白的表达.结果 (1)免疫荧光法检测显示,HeLa和Caski细胞中均有HPA蛋白的表达,均位于细胞核与细胞质中,呈红色荧光.(2)实时定量PCR技术检测显示,槲皮素组HeLa、Caski细胞中HPA mRNA的表达水平均随槲皮素浓度(分别为20、40、80 μmol/L)的升高、处理时间(分别为24、48、72 h)的延长而明显下降(P<0.01),呈浓度和时间依赖性.与空白对照组相比,槲皮素组中40、80 μmol/L槲皮素处理后HeLa、Caski细胞中HPA mRNA表达水平均明显下降(P<0.05);与阳性对照组相比,槲皮素组中80 μmol/L槲皮素处理后HeLa细胞中HPA mRNA表达水平无明显变化(P>0.05),而Caski细胞中HPA mRNA表达水平明显升高(P<0.01).(3)蛋白印迹法检测显示,槲皮素组HeLa、
作者:张文婷;张蔚;钟亚娟;吕琼莹;程静
来源:中华妇产科杂志 2013 年 48卷 3期