目的 研究微小RNA-135a(miR-135a)对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞系SKOV3细胞中HOXA1O基因表达及细胞增殖和凋亡的影响.方法 (1)应用生物信息学技术预测与miR-135a高度相关的靶基因(即HOXA10基因).(2)将miR-135a成熟体模拟物(mimics)、miR-135a成熟体抑制物(inhibitor)及阴性对照分别转染SKOV3细胞,采用逆转录(RT)-PCR技术和蛋白印迹法检测转染不同时间(分别为24、48和72 h)后SKOV3细胞中HOXA10 mRNA和蛋白的表达水平.(3)报告基因实验验证miR-135a对HOXA10基因表达的调节作用,采用含miR-135a的质粒和含HOXA10基因的重组质粒共同转染SKOV3细胞,以转染微小RNA (miRNA)慢病毒质粒者为对照.(4)采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测转染不同时间(分别为24、48和72 h)后SKOV3细胞的增殖能力[以吸光度(A)值表示],蛋白印迹法检测转染48 h后SKOV3细胞中凋亡相关蛋白[包括bcl-2、bax和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)]的表达.结果 (1)生物信息学技术预测,得出与miR-135a高度相关的靶基因为HOXA10基因.(2)RT-PCR技术检测显示,随着转染时间的延长(分别为24、48和72 h),miR-135a mimics转染后SKOV3细胞中HOXA10 mRNA的表达水平(分别为0.94±0.04、0.78 ±0.03、0.70±0.03)逐渐降低(P＜0.05)；miR-135a inhibitor转染后

作者：汤伟伟；万贵平；万一聪；张林；程文俊

来源：中华妇产科杂志 2013 年 48卷 5期