目的 初步探讨子宫内膜癌细胞中干细胞样(SP)细胞对醋酸甲羟孕酮(MPA)的抵抗作用及其机制.方法 (1)采用流式细胞仪Hoechst33342(是一种荧光染色液)染色法分选子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞中的SP细胞(即Ishikawa-SP细胞)和非SP细胞(即Ishikawa-non-SP细胞),采用平板克隆形成实验、免疫组化法分别检测Ishikawa-SP和Ishikawa-non-SP细胞的集落形成率及乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的表达.(2)不同浓度(分别为5、10、15、20 μmol/L)的MPA处理Ishikawa-SP、Ishikawa-non-SP、Ishikawa细胞不同时间(分别为24、48、72 h)后,采用甲烷硫代磺酸盐(MTS)法检测3种细胞生长的抑制率,选择Ishikawa细胞生长的抑制率最接近50％时MPA的处理浓度和时间(即为10 μmol/L的MPA处理72 h时)用于以下实验.(3)以10 μmol/L的MPA处理Ishikawa-SP、Ishikawa-non-SP、Ishikawa细胞72 h后,采用流式细胞仪检测3种细胞的凋亡率,采用免疫组化法检测3种细胞中凋亡蛋白——半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达.结果 (1)子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞中存在少量SP细胞,其比例为2.7％；Ishikawa-SP和Ishikawa-non-SP细胞的集落形成率分别为(6.02±1.17)％、(0.53±0.20)％,两者比较,差异有统计学意义(P=0.001)；Ishikawa-SP和Ishikawa-non-SP

作者：刘冰洁；李小平；赵丽君；王建六；魏丽惠

来源：中华妇产科杂志 2013 年 48卷 10期