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目的 探讨过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPARγ)基因表达对子宫内膜癌细胞迁移、侵袭及增殖能力的影响.方法 选取子宫内膜癌细胞系ECC-1(ER阳性)及KLE(ER阴性)细胞,分别转染PPARγ基因表达载体(PPARγ载体组)及PPARγ小分子干扰RNA(siRNA)质粒(PPARγsiRNA组),以转染无义序列siRNA(siRNA无义序列组)、空载体(空载体组)者为阴性对照,以只加入脂质体者(空白对照组)为空白对照.转染48 h后,实时逆转录(RT)-PCR技术及蛋白印迹法(western blot)检测细胞中PPARγmRNA及蛋白表达水平的变化;western blot检测细胞中Wnt信号传导通路中关键蛋白——β连接素(β-catenin)及髓细胞增生原癌基因编码蛋白(C-myc)蛋白表达水平的变化;体外迁移、侵袭实验检测细胞迁移、侵袭能力的变化,活细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖能力[以吸光度(A)值表示].结果 转染48 h后,实时RT-PCR技术和western blot检测显示,PPARγ载体组ECC-1及KLE细胞中PPARγ mRNA(分别为5.18 ±0.99、4.54±0.89)和蛋白(分别为1.45±0.12、1.30±0.13)的表达水平升高,β-eatenin(分别为0.44 ±0.06、0.46±0.04)、C-myc(分别为0.42±0.08、0.30±0.11)蛋白表达水平降低,PPAR γ siRNA组ECC-1及KLE细胞中PPAR γ mRNA(分别为0.48 ±0.08、0.53±0.11)和蛋白(分

作者:侯新新;赵萌;张贵宇

来源:中华妇产科杂志 2014 年 49卷 5期

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作者:
侯新新;赵萌;张贵宇
来源:
中华妇产科杂志 2014 年 49卷 5期
标签:
子宫内膜肿瘤 PPARγ 细胞运动 肿瘤侵润 细胞增殖 Endometrial neoplasms PPAR gamma Cell movement Neoplasm invasiveness Cell proliferation
目的 探讨过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPARγ)基因表达对子宫内膜癌细胞迁移、侵袭及增殖能力的影响.方法 选取子宫内膜癌细胞系ECC-1(ER阳性)及KLE(ER阴性)细胞,分别转染PPARγ基因表达载体(PPARγ载体组)及PPARγ小分子干扰RNA(siRNA)质粒(PPARγsiRNA组),以转染无义序列siRNA(siRNA无义序列组)、空载体(空载体组)者为阴性对照,以只加入脂质体者(空白对照组)为空白对照.转染48 h后,实时逆转录(RT)-PCR技术及蛋白印迹法(western blot)检测细胞中PPARγmRNA及蛋白表达水平的变化;western blot检测细胞中Wnt信号传导通路中关键蛋白——β连接素(β-catenin)及髓细胞增生原癌基因编码蛋白(C-myc)蛋白表达水平的变化;体外迁移、侵袭实验检测细胞迁移、侵袭能力的变化,活细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖能力[以吸光度(A)值表示].结果 转染48 h后,实时RT-PCR技术和western blot检测显示,PPARγ载体组ECC-1及KLE细胞中PPARγ mRNA(分别为5.18 ±0.99、4.54±0.89)和蛋白(分别为1.45±0.12、1.30±0.13)的表达水平升高,β-eatenin(分别为0.44 ±0.06、0.46±0.04)、C-myc(分别为0.42±0.08、0.30±0.11)蛋白表达水平降低,PPAR γ siRNA组ECC-1及KLE细胞中PPAR γ mRNA(分别为0.48 ±0.08、0.53±0.11)和蛋白(分