目的:检测肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)在紫杉醇耐药卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞和组织中的表达水平,并探讨HB-EGF与卵巢癌紫杉醇耐药性的关系。方法(1)体外实验:蛋白印迹法检测卵巢癌细胞株A2780(紫杉醇敏感)和A2780/Taxol(紫杉醇耐药)细胞中HB-EGF蛋白的表达。体外细胞实验分为4组,A2780+CRM197组、A2780/Taxol+CRM197组、A2780组、A2780/Taxol组,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测4组细胞的增殖能力[以吸光度(A)值表示],流式细胞仪检测4组细胞的细胞周期比例,酶标仪检测4组细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白的活性[以4硝基苯胺(pNa)浓度表示]。(2)体内实验:将A2780和A2780/Taxol细胞分别接种于裸鼠腋下,建立卵巢癌裸鼠移植瘤模型;免疫组化SP法检测裸鼠移植瘤组织中HB-EGF蛋白的表达。体内动物实验分为4组,方法同体外细胞实验分组,每组5只裸鼠,观察4组裸鼠移植瘤的生长情况,并计算抑瘤率。结果(1)体外实验结果:A2780/Taxol细胞中HB-EGF蛋白的表达水平为2.11±0.41,明显高于A2780细胞的0.75±0.20(P<0.01)。A2780+CRM197组、A2780/Taxol+CRM197组细胞增殖的抑制作用随CRM197浓度的增加而增强,呈明显的浓度依赖性(P<0.01),且当CRM197浓度≥1μg
作者:汤小晗;卢美松;李翠萍;邓锁;李萌
来源:中华妇产科杂志 2014 年 7期