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目的:通过观察缺氧条件下沉默Rab11基因对子宫颈癌细胞系SiHa细胞侵袭和迁移能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法实验分为4组:缺氧Rab11干扰组(缺氧状态下转染siRNA)、缺氧阴性干扰组(缺氧条件下转染空白无干扰意义的siRNA)、缺氧空白组(缺氧条件下培养)、常氧空白组(常氧条件下培养)。蛋白印迹法检测4组SiHa细胞中Ras相关蛋白11(Rab11)、整合素α5、整合素β3、磷酸化局部黏着斑激酶(p-FAK)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)及Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)的表达水平;实时荧光定量PCR技术检测4组SiHa细胞中Rab11 mRNA的表达水平;体外侵袭实验检测4组SiHa细胞的侵袭能力;体外迁移实验检测4组SiHa细胞的迁移能力;免疫荧光法检测4组SiHa细胞中Rac1蛋白的表达。结果(1)蛋白印迹法检测显示:①缺氧Rab11干扰组中SiHa细胞Rab11、整合素α5、整合素β3、p-FAK、p-PI3K、Rac1蛋白的表达水平分别为0.44±0.03、0.30±0.03、0.29±0.03、0.30±0.03、0.30±0.03、0.34±0.04;②缺氧阴性干扰组分别为0.72±0.03、0.73±0.03、0.59±0.03、0.61±0.03、0.59±0.03、0.72±0.03;③缺氧空白组分别为0.73±0.03、0.74±0.03、0.61±0.03、0.62±0.03、0.60±0.03、0.73±0.03;④常氧

作者:徐浩;袁园;纪佳音;姜倩;牛林军;刘念礼;章龙珍;王侠

来源:中华妇产科杂志 2016 年 51卷 12期

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作者:
徐浩;袁园;纪佳音;姜倩;牛林军;刘念礼;章龙珍;王侠
来源:
中华妇产科杂志 2016 年 51卷 12期
标签:
宫颈肿瘤 细胞系,肿瘤 rab GTP结合蛋白质类 rac1 GTP结合蛋白质 肿瘤侵润 细胞运动 缺氧 Uterine cervical neoplasms Cell line,tumor rab GTP-binding proteins rac1 GTP-binding protein Neoplasm invasiveness Cell movement Anoxia
目的:通过观察缺氧条件下沉默Rab11基因对子宫颈癌细胞系SiHa细胞侵袭和迁移能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法实验分为4组:缺氧Rab11干扰组(缺氧状态下转染siRNA)、缺氧阴性干扰组(缺氧条件下转染空白无干扰意义的siRNA)、缺氧空白组(缺氧条件下培养)、常氧空白组(常氧条件下培养)。蛋白印迹法检测4组SiHa细胞中Ras相关蛋白11(Rab11)、整合素α5、整合素β3、磷酸化局部黏着斑激酶(p-FAK)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)及Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)的表达水平;实时荧光定量PCR技术检测4组SiHa细胞中Rab11 mRNA的表达水平;体外侵袭实验检测4组SiHa细胞的侵袭能力;体外迁移实验检测4组SiHa细胞的迁移能力;免疫荧光法检测4组SiHa细胞中Rac1蛋白的表达。结果(1)蛋白印迹法检测显示:①缺氧Rab11干扰组中SiHa细胞Rab11、整合素α5、整合素β3、p-FAK、p-PI3K、Rac1蛋白的表达水平分别为0.44±0.03、0.30±0.03、0.29±0.03、0.30±0.03、0.30±0.03、0.34±0.04;②缺氧阴性干扰组分别为0.72±0.03、0.73±0.03、0.59±0.03、0.61±0.03、0.59±0.03、0.72±0.03;③缺氧空白组分别为0.73±0.03、0.74±0.03、0.61±0.03、0.62±0.03、0.60±0.03、0.73±0.03;④常氧