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目的 探讨肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)通过上调核因子κB(NF-κB)的表达从而诱导卵巢上皮性癌(卵巢癌)对紫杉醇耐药的作用及可能的机制.方法(1)NF-κB表达的检测:将卵巢癌亲本细胞系A2780细胞和紫杉醇耐药细胞系A2780/Taxol细胞及其对应的裸鼠分成4组,即A2780组、A2780+交叉反应物质197(CRM197,为HB-EGF抑制剂)组、A2780/Taxol组和A2780/Taxol+CRM197组,采用双重免疫荧光染色法检测4组卵巢癌细胞中HB-EGF和表皮生长因子受体(EGFR)蛋白的表达,蛋白印迹法(western blot法)检测4组卵巢癌细胞中NF-κB的表达,免疫组化SP法检测4组裸鼠移植瘤组织中NF-κB蛋白的表达.(2)NF-κB功能的检测:将A2780/Taxol细胞分4组,即空载体组、NF-κB小分子干扰RNA(siRNA)组、空载体+CRM197组、NF-κB siRNA+CRM197组,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测4组A2780/Taxol细胞对紫杉醇的耐药性[以50

作者:汤小晗;卢美松;邓锁;李萌

来源:中华妇产科杂志 2019 年 54卷 4期

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作者:
汤小晗;卢美松;邓锁;李萌
来源:
中华妇产科杂志 2019 年 54卷 4期
标签:
肝素结合表皮生长因子 核因子κB 卵巢肿瘤 紫杉酚 Heparin-binding EGF-like growth factor NF-kappa B Ovarian neoplasms Paclitaxel
目的 探讨肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)通过上调核因子κB(NF-κB)的表达从而诱导卵巢上皮性癌(卵巢癌)对紫杉醇耐药的作用及可能的机制.方法(1)NF-κB表达的检测:将卵巢癌亲本细胞系A2780细胞和紫杉醇耐药细胞系A2780/Taxol细胞及其对应的裸鼠分成4组,即A2780组、A2780+交叉反应物质197(CRM197,为HB-EGF抑制剂)组、A2780/Taxol组和A2780/Taxol+CRM197组,采用双重免疫荧光染色法检测4组卵巢癌细胞中HB-EGF和表皮生长因子受体(EGFR)蛋白的表达,蛋白印迹法(western blot法)检测4组卵巢癌细胞中NF-κB的表达,免疫组化SP法检测4组裸鼠移植瘤组织中NF-κB蛋白的表达.(2)NF-κB功能的检测:将A2780/Taxol细胞分4组,即空载体组、NF-κB小分子干扰RNA(siRNA)组、空载体+CRM197组、NF-κB siRNA+CRM197组,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测4组A2780/Taxol细胞对紫杉醇的耐药性[以50