目的通过观测人HBV DNA在非哺乳动物-鸭肝细胞中的复制和表达水平,探讨人HBV感染与复制的跨种属特异性,为建立人HBV DNA转染跨种属肝细胞模型奠定基础. 方法获取线性HBV DNA并电转染原代鸭肝细胞,电转后48h采用IMX系统检测鸭肝细胞中HBsAg和HBeAg表达水平,用Southern blotting和dot blotting检测HBV DNA复制情况.以单纯电击肝细胞为对照. 结果转染组原代鸭肝细胞裂解液中HBsAg为9.10(P/N值≥2.1为阳性),HBeAg为阴性;上清液中二者均为阴性.转染组原代鸭肝细胞裂解液dot blotting呈强阳性;转染组肝细胞总DNA Southern blotting显示约4.0kb以下分子涂抹带,为游离复制型HBV DNA,包括rcDNA、cccDNA与ssDNA等复制中间体;未见整合型HBV DNA-高分子区(4.0～24.0kb)涂抹带.对照组上述指标均为阴性. 结论人HBV DNA能在原代鸭肝细胞中复制和表达,可能为肝细胞内环境依赖性,无严格种属特异性限制.
作者：姚云清；黄爱龙；唐霓；王波；张定凤
来源：中华肝脏病杂志 2002 年 10卷 1期
