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目的:克隆精子表面蛋白P34H基因的编码区,为进一步体外表达P34H蛋白做准备.方法:提取人附睾体部总RNA,并以此为模板,进行反转录PCR获得编码P34H蛋白的基因片段.应用T/A克隆策略,将扩增的P34H基因编码区克隆入T载体,并通过双酶切和DNA测序进行鉴定.同时,以β-actin为内参照物,进行反转录PCR半定量分析,比较P34H在附睾头部、体部和尾部及睾丸组织中的表达量.结果:成功地克隆了P34H基因.将P34H的cDNA序列登录GenBank,登录号为AF515625.反转录PCR半定量分析表明P34H主要在附睾体部表达.结论:克隆的P34H基因可用于构建表达载体.
作者：夏欣一；许晓风；高云；黄宇烽
来源：中华男科学 2003 年 9卷 1期
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