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目的:利用前列腺特异性抗原(PSA)启动子的组织特异性表达的特点,克隆出DNA片段并对其表达效率和组织特异性表达进行初步研究.方法:从前列腺组织中提取染色体组,PCR扩增出PSA启动子的两个上游片段a(含AR Ⅰ和ARⅡ)和b(含ARⅢ),利用报告基因egfp,分别构建3个载体pa-EGFP、pba-EGFP和p△ba-EGFP,并转染细胞HepG2、SMMC-7721、Hela和PC-3,观察表达情况.结果:pba-EGFP在前列腺癌细胞PC-3中的绿色荧光强度明显高于pa-EGFP和p△ba-EGFP,说明片段b(含ARⅢ)能显著增强PSA启动子的转录能力.pa-EGFP、p△ba-EGFP和pba-EGFP转染HepG2、SMMC-7721和Hela细胞,未见表达.结论:基于PSA启动子的组织特异性和调节序列构建的靶向载体,在治疗中加上功能蛋白将为临床实验提供一个坚实的平台.

作者:胡瑜;商学军;葛京平;孙怡;黄宇烽

来源:中华男科学杂志 2005 年 11卷 12期

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作者:
胡瑜;商学军;葛京平;孙怡;黄宇烽
来源:
中华男科学杂志 2005 年 11卷 12期
标签:
前列腺特异性抗原启动子 雄激素反应元件 克隆 表达
目的:利用前列腺特异性抗原(PSA)启动子的组织特异性表达的特点,克隆出DNA片段并对其表达效率和组织特异性表达进行初步研究.方法:从前列腺组织中提取染色体组,PCR扩增出PSA启动子的两个上游片段a(含AR Ⅰ和ARⅡ)和b(含ARⅢ),利用报告基因egfp,分别构建3个载体pa-EGFP、pba-EGFP和p△ba-EGFP,并转染细胞HepG2、SMMC-7721、Hela和PC-3,观察表达情况.结果:pba-EGFP在前列腺癌细胞PC-3中的绿色荧光强度明显高于pa-EGFP和p△ba-EGFP,说明片段b(含ARⅢ)能显著增强PSA启动子的转录能力.pa-EGFP、p△ba-EGFP和pba-EGFP转染HepG2、SMMC-7721和Hela细胞,未见表达.结论:基于PSA启动子的组织特异性和调节序列构建的靶向载体,在治疗中加上功能蛋白将为临床实验提供一个坚实的平台.