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目的:制备并鉴定抗人精子表面蛋白P34H的单克隆抗体(McAb).方法:以重组P34H蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术建立分泌抗P34H McAb的细胞株,并制备腹水型McAb,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western印迹鉴定其敏感性及特异性.结果:获得1株(2C4)IgG1 Kappa型抗P34H McAb.ELISA结果表明腹水型McAb效价可达1:103~1:105,Western印迹显示该McAb既能特异性地结合精子膜蛋白中相对分子质量(Mr)约为34 000的天然抗原,又能特异性地结合Mr约为27 000重组P34H蛋白.结论:用上述方法成功制备抗P34H McAb,为进一步研究P34H与男性生殖的关系奠定了基础.

作者:夏欣一;吴永明;潘连军;高云;金保方;黄宇烽

来源:中华男科学杂志 2006 年 12卷 11期

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作者:
夏欣一;吴永明;潘连军;高云;金保方;黄宇烽
来源:
中华男科学杂志 2006 年 12卷 11期
标签:
P34H 精子表面蛋白 附睾 单克隆抗体
目的:制备并鉴定抗人精子表面蛋白P34H的单克隆抗体(McAb).方法:以重组P34H蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术建立分泌抗P34H McAb的细胞株,并制备腹水型McAb,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western印迹鉴定其敏感性及特异性.结果:获得1株(2C4)IgG1 Kappa型抗P34H McAb.ELISA结果表明腹水型McAb效价可达1:103~1:105,Western印迹显示该McAb既能特异性地结合精子膜蛋白中相对分子质量(Mr)约为34 000的天然抗原,又能特异性地结合Mr约为27 000重组P34H蛋白.结论:用上述方法成功制备抗P34H McAb,为进一步研究P34H与男性生殖的关系奠定了基础.