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目的:观察腺病毒载体介导特异性短发夹RNA(shRNA)对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,为应用RNA干扰(RNAi)技术治疗阴茎勃起功能障碍(ED)提供实验依据. 方法:成功构建携带3条针对人PDESA3基因位点特异性shRNA的重组腺病毒(rAd5-shRNA-PDE5A3),并设立阴性对照病毒组和空白对照组,分别转染人阴茎海绵体平滑肌细胞.以放射免疫法分别检测转染重组腺病毒24、48、72 h后细胞内cGMP浓度变化,观察rAd5-shRNA-PDE5A3对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响. 结果:实验组rAd5-shRNA-PDESA3转染人阴茎海绵体平滑肌细胞后胞内cGMP水平显著高于阴性对照组和空白对照组,在转染后72 h最为显著. 结论:3条特异性针对人PDE5A3 mRNA靶位点的shRNA可有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,增强对PDE5基因的阻抑效果.
作者：潘运高；刘继红；詹鹰；王涛；万志华；李忠远；刘云
来源：中华男科学杂志 2009 年 15卷 8期
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