目的:应用荧光染料SYBR-14/PI双色标记法进行流式细胞术检测不育患者精子质膜完整性,分析吸烟对精子质膜完整性的影响并探讨其临床意义. 方法:收集202例男性精液标本,其中132例为本院就诊男性不育患者,分为大烟量组(n=68)与小烟量组(n=64),正常生育男性为正常对照组(n=70).通过计算机辅助精液分析系统进行精液常规分析.精液标本经PBS洗涤处理后用荧光染料SYBR-14/碘化丙锭(PI)双染后上流式细胞仪分析,用SYBR-14+/PI-(绿)表示质膜完整精子(PMI)；SYBR-14-/PI+(红)表示质膜破损而坏死的精子；SYBR-14 +/PI+(绿,红)表示正处于由活到死过度状态的精子.检测精子质膜完整性,并对精子质膜完整性与部分精液参数做相关性分析. 结果:大烟量组与小烟量组质膜破损的坏死精子(SYBR-14-/PI+％)、过渡态的精子(SYBR-14 +/PI-％)与正常对照组存在显著差异(P ＜0.01或0.05).大烟量组SYBR-14+/PI-％明显低于小烟量组,SYBR-14-/PI+％明显高于小烟量组.所有202例标本SYBR14+/PI-％与精子活动率呈显著正相关(r=0.938,P=0.000). 结论:应用流式细胞术SYBR-14/PI双染法能快速、准确地检测精子质膜完整性.吸烟会导致精子质膜完整性下降,引起精子活力下降,可能是导致男性不育的重要原因之一.
作者：李卫巍；李娜；吴秋月；夏欣一；崔英霞；黄宇烽；姚勤
来源：中华男科学杂志 2012 年 18卷 12期
