目的:探讨miR-124抑制前列腺癌PC3细胞增殖活性的机制. 方法:利用荧光素酶报告基因验证miR-124能否靶向作用于丙酮酸激酶M2型(PKM2)3端非编码区(UTR).将miR-124 mimic转染至PC3细胞后,采用实时荧光定量PCR和Western印迹检测前列腺癌PC3细胞PKM2 mRNA和蛋白的表达水平,MTT法检测miR-124 mimic与PKM2 siRNA对PC3细胞生长活性的影响. 结果:与人前列腺上皮细胞RWPE-1比较,PC3细胞中PKM2 mRNA和蛋白水平表达分别上调(5.12 ±-0.35)倍和(4.05±0.20)倍(P＜0.05).荧光素酶报告基因结果证实,PKM2是miR-124调控的靶基因,miR-124可特异性地结合于PKM2 mRNA的3'-UTR.转染miR-124 mimic 24 h后,PKM2蛋白水平下调至阴性对照组(0.16±0.04)倍(P＜0.05),但对PKM2 mRNA表达无显著影响(P＞0.05).MTT结果显示,转染miR-124 mimic和PKM2 siRNA都能显著抑制PC3细胞的增殖,但miR-124 mimic对PC3细胞生长活性的抑制能力较PKM2 siRNA强.转染miR-124 mimic和PKM2 siRNA 24 h和48 h后,PC3细胞的增殖率分别为(66.20±5.10)％和(82.10 ±6.35)％(P＜0.05)、(49.34±2.37)％和(70.10 ±5.80)％ (P ＜0.05). 结论:miR-124可通过靶向调控PKM2基因的表达而抑制前列腺癌PC3细胞的增殖.

作者：吕磊；袁敬东；操作亮；黄韬；章传华；汪良；曾甫清

来源：中华男科学杂志 2014 年 20卷 6期