目的 研究灵芝提取物对帕金森病模型细胞凋亡的保护作用.方法 采用CCK-8法检测细胞活性,JC-1染色倒置显微镜检测细胞线粒体膜电位,试剂盒检测细胞ROS水平,细胞免疫荧光双重染色方法观察细胞色素C的表达与定位情况,Western blot法检测caspase-3、caspase-9活化和前体形式蛋白表达.结果 灵芝提取物不影响neuro-2a细胞的生长与增殖.采用1 mmol/L MPP+损伤作用持续48 h,当灵芝提取物浓度为800μg/mL时,细胞活性增加(P<0.05).MPP+可造成neuro-2a细胞线粒体膜电位下降,而灵芝提取物可以改善MPP+对neuro-2a细胞线粒体膜电位造成的影响,并抑制ROS的聚集.与模型组比较,灵芝提取物能抑制MPP+诱导的细胞色素C从线粒体的释放,降低相同时间段内cleaved-caspase-3/pro-caspase-3、cleaved-caspase-9/pro-caspase-9比值.结论 灵芝提取物能抑制MPP+诱导的neuro-2a细胞凋亡,其作用机制可能与维持线粒体正常膜电位,稳定线粒体功能,降低cleaved-caspase-3/pro-caspase-3、cleaved-caspase-9/pro-caspase-9比值有关.
作者:黄茜;任志丽
来源:中成药 2022 年 44卷 6期