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目的建立快速、敏感、特异的淋球菌感染实验诊断方法.方法采用溴化己二烯苯基三乙基胺-乙醇沉淀法提取淋球菌外膜蛋白复合物,以Z3.14、EDTA萃取外膜蛋白,经二乙氨基乙酸纤素-Sepharose CL-6B层析纯化获得主要外膜蛋白(PI),并按免疫杂交瘤技术建立分泌抗PI单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株.结果获得了WI群淋球菌的PIA和WⅡ/WⅢ群淋球菌的PIB,SDS-PAGE测得PIA的分子量为35 200,PIB的分子量为36 700.建立了可持续、稳定分泌抗PIA McAb的杂交瘤细胞2株和抗PIB McAb的杂交瘤细胞3株.5株杂交瘤细胞培养上清液的抗体滴度为1:64～1:256,其诱生的BALB/c小鼠腹水中的抗体滴度为1:4 096～1:16 384,与淋球菌呈高效价反应,与脑膜炎双球菌等其他抗原不发生反应.结论获得的高纯度PI及其McAb为建立快速、敏感、特异的淋球菌感染实验诊断方法奠定了基础.
作者：周旺；郑卫；沈关心；朱慧芬；张悦；夏正喜
来源：中华皮肤科杂志 2003 年 36卷 2期
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